彩色SDS-PAGE凝胶试剂盒
产品简介: 本产品将传统凝胶配置过程进行了优化,采用上层胶和下层胶的预混配方,加入新型促凝剂即可凝胶,快速简捷。该产品的上层胶为淡红颜色,点样孔辨识度高,便于点样。本产品即适用于传统凝胶制备,也适用于一步法凝胶制备 ,助力高效完成科研实验。
产品特点: 无需繁琐计算,按步骤快速制备凝胶。
淡红色上层胶,胶孔辨识度高,易于加样。
无需使用TEMED,无恶臭刺鼻气味。
保存条件: 常温运输,短时间可在室温下保存,2个月。 长期保存放4度冰箱,12个月
实验步骤: 以实验室常用使用Bio-Rad Mini 1.0mm厚10%凝胶配制为例
传统二步法制胶步骤如下:
(一)下层胶配制:
1. 取等体积的下层胶溶液和下层胶缓冲液各 2.5ml,混匀。
2. 吸取80ul新型促凝剂加至上述混合液中,混匀。
3. 将上述配制好的混匀液加入制胶板内, 加入适量的水覆盖与下层胶上,压平下层胶, 观察当水和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固(约20分钟左右),弃去上层水,用滤纸吸尽多余的水。
(二)上层胶配制
1. 取等体积的上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液各0.75ml,混匀。(注意:使用前请摇匀)。
2. 吸取30ul新型促凝剂加至上述混合液中,混匀。
3. 将上述配制好的混匀液加入制胶板内,插入梳齿。
4. 待上层胶凝固后(20分钟左右),取出梳子,完成凝胶制备过程。
下层胶配方 |
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上层胶配方 |
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凝胶厚度 |
下层胶溶液 |
下层胶缓冲液 |
新型促凝剂 |
凝胶厚度 |
上层胶溶液 |
上层胶缓冲液 |
新型促凝剂 |
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0.75 mm |
2.0 ml |
2.0 ml |
80 ul |
0.75 mm |
0.5 ml |
0.5 ml |
80 ul |
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1.0 mm |
2.5 ml |
2.5 ml |
80 ul |
1.0 mm |
0.75 ml |
0.75 ml |
80 ul |
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1.5 mm |
4.0 ml |
4.0 ml |
80 ul |
1.5 mm |
1.0 ml |
1.0 ml |
80 ul |
一步法制胶步骤如下:
1. 取等体积的下层胶溶液和下层胶缓冲液各 2.5ml,混匀。
2. 取等体积的上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液各0.75ml,混匀。(注意:由于红色颜料的理化性质,使用前请摇匀)。
3. 向步骤1的混合溶液中加入80μL 的新型促凝剂,混匀。将混匀后的溶液注入制胶玻璃板内,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5 cm即可
(注意:此溶液为过量,请勿全部注入)。
4. 向步骤2的混合溶液中加入30μL的新型促凝剂,轻柔混匀,无需等待下层胶凝固,即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中,插入梳齿。(注意:灌注上层胶溶液一定要轻缓,避免将上层胶溶液冲入下层胶液中)。
5. 待上层胶凝固后(20分钟左右),取出梳齿,完成凝胶制备过程。
(注意:胶凝固后,上下层胶分界线平整度弱于常规两步法配制的胶,但对电泳没有影响)
注意事项: 1. 接触皮肤或眼睛请立即用大量清水冲洗,丙烯酰胺有神经毒性,请戴橡胶手套操作。
2. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小新型促凝剂的用量;室温较低,可适当延长凝胶时间;
3. 室内湿度较低时可能导致水蒸发过快使加样孔高度降低,避免长时间放置。
4. 新型促凝剂室温长时间放置会失效,实验完成后放4度冰箱备用,但时间不超过2个月。